Flavonoidok hatásának vizsgálata a CYP450 enzimrendszerre sertés bélhám sejtkultúrán

Abstract

A gyógyszerek és más xenobiotikumok metabolizmusában szerepet játszó citokróm P450 (CYP) enzimrendszer régóta nagy figyelmet kap a gyógyszerek kinetikájának vizsgálatakor. Gyógyszer adminisztráció után (különösen orális beadási mód esetén) a kialakuló plazmaszintet, vagyis a szer biológiai hasznosulását jelentősen befolyásolják a CYP enzimek által katalizált oxidációs folyamatok. Az azonos CYP izoenzim metabolizálta gyógyszerek, vagy táplálék összetevők interakcióba léphetnek egymással, továbbá egyes szerek a CYP enzimek indukciójára vagy inhibíciójára is képesek lehetnek. Mindez hatással lehet a gyógyszerek alkalmazandó dózisára, és toxicitásukra is. A CYP enzimek legnagyobb mennyiségben a májban fordulnak elő, de a bélcsatornában jelen lévő képviselőik hatása sem elhanyagolható. Kísérletünk során a bélhám CYP enzimeit vizsgáltuk két flavonoiddal kezelve (apigenin, és származéka, a trimetoxi-apigenin), melyek számos jótékony hatásuk miatt napjainkban előszeretettel alkalmazott táplálékkiegészítő vegyületek. A vizsgálat során sertés jejunumból származó enterocyta sejtvonalat (IPEC-J2) használtunk, melyet kollagénnel bevont 24 lyukú edényekben tenyésztettünk. A sejtek egy részéhez apigenint adtunk 25 μM és 50 μM, másokhoz trimetoxi-apigenint 25 μM koncentrációban. Az eredmények összehasonlításához egyes sejtek kezeletlenül maradtak, másokhoz ismert CYP induktort (phenobarbital 1mM), megint másokhoz pedig ismert CYP gátlókat is adtunk (50 μM naftoflavon + 25 μM ketoconazol). Kemilumineszcens módszerrel vizsgáltuk a CYP1A1, 1A2 és 3A4 enzimek aktivitását, továbbá a gyógyszer-interakció lehetőségét az apigenin és egy gyulladáscsökkentő vegyület (antipirin) esetében.