A 11-béta-hidroxiszteroid-dehidrogenáz 1-es típusának kifejeződése kutya petefészekben
Absztrakt
Kutatásunk célja a 11β-HSD1 enzim szöveti expressziójának vizsgálata volt kutyák műtétileg eltávolított petefészkeiben. Az ovariectomia vagy ovariohysterectomia során eltávolított egészséges vagy kórosan elváltozott petefészkek a Szent István Egyetem Állatorvos-tudományi Kar Szülészeti és Szaporodásbiológiai Tanszék és Klinika beteganyagából származtak. A mintákból 8%-os pufferolt formaldehid oldat segítségével történt fixálást követően gépi szövet előkészítés után paraffinos blokkok, majd haematoxilinnal és eosinnal festett metszetek készültek. Ezt követően az immunhisztokémiai vizsgálat során 11β-HSD1 ellenanyagot és AEC kromogént alkalmaztunk. Az elkészült mintákat fénymikroszkóp segítségével értékeltük ki.
A 11β-HSD1 ellenanyag erős immunreaktivitást mutatott a vizsgálatban. A kutyák sárgatestjeit alkotó a granulosa lutein sejtek minden esetben egyértelműen pozitív reakciót adtak, azonban a sejtek festődése nem volt azonos mértékű. Sejten belül is inhomogenitást tapasztaltunk a reakcióban. A petefészek tüszőinek sejtjeinél fejlődési stádiumuknak megfelelően változott a pozitivitás. A petesejt esetében csökkenő festődést figyelhettünk meg az érés során, a granulosa és a theca interna sejtek enyhe pozitivitást mutattak. A follikuláris fázis alatt jellemző alacsonyabb 11β-HSD expresszió hátterében feltehetően nagyrészt a magas ösztrogén termelés gátló hatása áll, de a progeszteron szint és a tüszőfolyadék összetétele is befolyásolhatja azt. A felületi epithel sejtek, stroma sejtek mintáink nagy részében nem festődtek, azonban határozott negativitást sem tudtunk megállapítani.
Legtöbb megfigyelésünk egyezik a humán illetve patkány petefészek esetében megállapított adatokkal, azonban a reakció nehéz értékelhetősége miatt a tüszők theca sejtjei és a stroma sejtek esetében nem jutottunk egyértelmű eredményre.
Összességében megállapítottuk, hogy a 11β-HSD1 ellenanyag kutyákban is alkalmas az egészséges és az elváltozott petefészkek részletes vizsgálatára. Az ivari ciklus és az enzim expresszió összefüggésének értékeléséhez azonban további vizsgálatokra van szükség.