Piwi gének szerepe a tumorképződésben Drosophila melanogaster modellorganizmusban

Abstract

Az Argonauta fehérjecsaládba tartozó PIWI fehérjék részt vesznek az embrionális fejlődésben, sejtek differenciálódásában és transzpozonok csendesítésében. Ecetmuslicában három PIWI alcsládba sorolható fehérje van jelen: Piwi, Aubergine (Aub), valamint Argonauta 3 (Ago3). A Piwi fehérje nélkülözhetetlen az elsődleges Piwi-piRNS útvonal lejátszódásához a sejtmagban, míg az Aub és Ago3 fehérjék a citoplazmában lezajló másodlagos Piwi-piRNS útvonalban, más néven ping-pong ciklusban vesznek részt. Az elsődleges útvonal során történik a transzpozonok transzkripciós szintű csendesítése, a másodlagos útvonal, pedig poszt-transzkripciósan képes inaktiválni a mobilis genetikai elemeket. A transzpozonok csendesítése által a Piwi-piRNS útvonal elengedhetetlen az egészséges sejtek stabil genomjának megőrzéséhez. Az útvonal szintén fontos szerepet játszhat abban, hogy a tumorsejtek genomja ne váljon túlzottan instabillá. Az ecetmuslicában előforduló három PIWI fehérje tumorgenezisre gyakorolt hatásának vizsgálatát tűztem ki célul RasV12, vagy YorkiCA onkoproteineket túltermelő tumormodellállatok lárvális szem-antenna diszkuszaiban. A kutatás során a piwi, aub és Ago3 gének mRNS szintű expresszióját PCR-rel, a Piwi fehérje mennyiségét és lokalizációját fluoreszcens mikroszkóppal vizsgáltam. A piwi géncsendesítés tumorra gyakorolt hatásának vizsgálatához piwi-RNSi konstrukciókat használtam fel.