A Micro Tester redox-potenciál mérő felhasználhatósága antibiotikum-rezisztencia vizsgálatok során E. coli baktérium törzsön

Abstract

Az antibiotikum rezisztencia vizsgálat manapság egyre inkább előtérbe kerül a rezisztencia terjedése és így a hatékony antibiotikum választék beszűkülése révén. A megfelelő antibiotikum kiválasztását könnyíti meg a rezisztenciavizsgálat. Sajnos az általánosan alkalmazott korongdiffúziós módszer időigényes eljárás. A korrekt kiértékeléshez meg kell várni, hogy a baktériumok szabad szemmel is látható telepeket képezzenek. Ez legrövidebb esetben is napokat vehet igénybe. Azt tapasztaltuk, hogy a redox-potenciál mérő berendezéssel kapott eredmények már a mérések kezdetétől számított 6 órán belül eredményt adnak. Méréseink rávilágítottak, hogy a módszer még tökéletesítésre szorul, azonban tovább fejlesztve alkalmas lehet főleg akut septicus folyamatok oktani, célzott kezelésének mihamarabbi megkezdéséhez. A redox-potenciál mérő használata egyszerű, a mérések jól standardizálhatóak, ismételhetőek. A redox-görbék elemzése pedig jóval túlmutat a korongdiffúzióval kapható gátlási zónaátmérők mérésén. Tájékoztat bennünket a mikrobapusztulás, ill. aktivitáscsökkenés törvényszerűségeiről, a legkisebb gátló antibiotikum-koncentrációról. Kalibrációs görbék segítségével a MIC50, ill. MIC90 értékek is kalkulálhatók. Esetleg közelítő jelleggel meghatározható lehet az antibiotikumok hatásának kialakulásához szükséges idő, mely nagyban koncentrációfüggő és természetesen a kellő helyen kialakuló terápiás koncentráció elérésétől értendő. Munkánk során azonban mindig problémák sokaságával találtuk magunkat szemben, a redox-potenciál mérése nem túlságosan elterjedt eljárás a mikrobiológiában és főleg nem a rezisztenciavizsgálatok során. Ennek megfelelően irodalmi adatok nem állnak rendelkezésre az alkalmazandó antibiotikum-koncentrációkról. A tanszék számos mérést végzett már különböző mikrobákkal, de ez a sor még messze nem teljes, főleg nem a potenciálisan akut, septicus folyamatokért felelős mikrobák esetében. Szükség lenne egy megfelelő eljárásra, mely a kérdéses koncentrációk felhasználásával értékes referenciaadatokat szolgáltat (a korongdiffúziós módszernél felhasznált antibiotikum korongok nem az általunk felhasznált koncentrációkat tartalmazzák), hogy a mérések bármikor összehasonlíthatóak legyenek.

The testing of antibiotic resistance grows more important very day, due to the spreading of resistance, and the narrowing of the selection of efficient antibiotics. The testing of resistance greatly eases the selection of adequate antibiotics. Unfortunately, the wide-spread disc-diffusion method is a very time consuming process. In order to evaluate the results correctly, bacterial growth has to reach the level of visible colonies. This means days, even in the swiftest cases. According to our experience, test by the redox-potency tester show results within 6 hours (calculated from the beginning of the test). Our results show, that even though the method needs adjustments, provided that these are made, this method can be used to initiate causal treatment of acute, septic processes at the soonest possible time. The redox potency tester is easy to use; the test can be easily standardized, and repeated. The analysis of redox-curves is far more advanced than the measuring of zone-diameters achieved by dis-diffusion. It informs us about microbe death, the rules of the reduction of activity, the lowest inhibiting antibiotic concentration, and with the help of calibration curves, MIC 50, and MIC90 values can both be calculated. With this method, the time necessary for the antibiotics to take effect can be determined, which is greatly related to concentration, and of course is measured after reaching the therapy concentration on the spot. Unfortunately we faced several problems during the course of our work: the measurement of redox potency is not a widespread method in microbiology, and especially not in the field of resistance-tests. There are no data available for the desired antibiotic concentration. Our Department has made several measures with different microbes so far, but the line of tests is not complete, especially in the case of bacteria responsible for acute, septic lesions. An adequate method is needed, with which we could gain valuable references for the questioned concentrations (the antibiotic discs used in disc diffusion methods have different concentrations), in order for the test to be compared at any time.